ग्यास क्रोमैटोग्राफी विभाजन विश्लेषण चरणहरू

को फाइदा ग्यास क्रोमैटोग्राफी यो हो कि यसले धेरै घटकहरूको मिश्रणलाई अलग र विश्लेषण गर्न सक्छ। यद्यपि, क्रोमेटोग्राफिक विश्लेषणको लागि प्रयोग गर्न सकिने धेरै पदार्थहरू भएकाले, एउटै स्थिर चरणमा विभिन्न घटकहरूको क्रोमेटोग्राफिक चुचुराहरूको उपस्थिति समय समान हुन सक्छ, त्यसैले क्रोमेटोग्राफिक चुचुराहरूमा आधारित अज्ञात पदार्थहरूलाई मात्र चित्रण गर्न गाह्रो छ। अज्ञात नमूनाको लागि, हामीले पहिले यसको स्रोत, प्रकृति, र विश्लेषणात्मक उद्देश्य बुझ्नुपर्छ; यस आधारमा, हामी नमूनाको प्रारम्भिक अनुमान गर्न सक्छौं; र त्यसपछि ज्ञात शुद्ध पदार्थ वा सान्दर्भिक क्रोमेटोग्राफिक गुणात्मक सन्दर्भ डेटामा आधारित गुणात्मक पहिचान सञ्चालन गर्न निश्चित विधि प्रयोग गर्नुहोस्। कृपया निम्न हेर्नुहोस्:

1. नमूनाहरूको स्रोत र पूर्व उपचार विधि

GC द्वारा प्रत्यक्ष रूपमा विश्लेषण गर्न सकिने नमूनाहरू सामान्यतया ग्यास वा तरल पदार्थ हुन्। ठोस नमूनाहरू विश्लेषण गर्नु अघि उपयुक्त विलायकमा विघटन गरिनुपर्छ, र नमूनाहरूमा GC द्वारा विश्लेषण गर्न नसकिने अवयवहरू (जस्तै अकार्बनिक लवण) समावेश नगर्ने सुनिश्चित गर्नुहोस्, जसले क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भका अवयवहरूलाई क्षति पुर्‍याउन सक्छ। यसरी, जब हामीले अज्ञात नमूना प्राप्त गर्छौं, हामीले स्रोतलाई बुझ्नुपर्छ, ताकि नमूनामा समावेश हुन सक्ने कम्पोनेन्टहरू र नमूनाको उबलने बिन्दु दायरा अनुमान गर्न सकिन्छ। यदि नमूना प्रणाली सरल छ र नमूना घटक वाष्पीकरण गर्न सकिन्छ, यो सीधा विश्लेषण गर्न सकिन्छ। यदि त्यहाँ नमूनामा कम्पोनेन्टहरू छन् जुन GC द्वारा प्रत्यक्ष रूपमा विश्लेषण गर्न सकिँदैन, वा नमूना एकाग्रता धेरै कम छ भने, आवश्यक पूर्व-उपचार गर्नुपर्छ, जस्तै सोखन, विश्लेषण, निकासी, एकाग्रता, पतन, शुद्धीकरण, डेरिभेटाइजेशन र नमूना प्रक्रिया गर्न अन्य विधिहरू।

2. उपकरण कन्फिगरेसन निर्धारण गर्नुहोस्

तथाकथित उपकरण कन्फिगरेसनले कुन नमूना इंजेक्शन उपकरण, कुन क्यारियर ग्यास, कुन क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भ र कुन डिटेक्टर नमूनाहरू विश्लेषण गर्न प्रयोग गरिन्छ भनेर बुझाउँछ।

सामान्यतया, डिटेक्टर प्रकार पहिले निर्धारण गर्नुपर्छ। FID डिटेक्टरहरू प्रायः हाइड्रोकार्बनको लागि छनोट गरिन्छ, र ECD डिटेक्टरहरू अधिक इलेक्ट्रोनेगेटिभ समूहहरू (F, Cl, इत्यादि) र कम हाइड्रोकार्बन सामग्री भएका पदार्थहरूको लागि छनौट गर्न सजिलो हुन्छ। जब पत्ता लगाउने संवेदनशीलता आवश्यकताहरू उच्च छैनन् वा गैर-हाइड्रोकार्बन घटकहरू समावेश छन्, TCD डिटेक्टरहरू छनौट गर्न सकिन्छ; सल्फर र फस्फोरस युक्त नमूनाहरूको लागि, FPD डिटेक्टरहरू छनौट गर्न सकिन्छ।

तरल नमूनाहरूको लागि, तपाइँ डायाफ्राम प्याड इंजेक्शन विधि छनौट गर्न सक्नुहुन्छ, र ग्याँस नमूनाहरूले छ-तर्फी भल्भ वा सोखन थर्मल desorption इंजेक्शन विधि प्रयोग गर्न सक्नुहुन्छ। सामान्य क्रोम्याटोग्राफीले केवल डायाफ्राम प्याड इंजेक्शन विधि कन्फिगर गर्दछ, त्यसैले ग्याँस नमूनाहरू सोखन-विलायक विश्लेषण-डायाफ्राम प्याड इंजेक्शन विधि प्रयोग गरेर विश्लेषण गर्न सकिन्छ।

परीक्षण गरिनु पर्ने अवयवहरूको गुण अनुसार उपयुक्त क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भहरू चयन गर्नुहोस्, र सामान्यतया समानता र अनुकूलताको नियम पालना गर्नुहोस्। गैर-ध्रुवीय पदार्थहरू अलग गर्दा गैर-ध्रुवीय स्तम्भ चयन गर्नुहोस्, र ध्रुवीय पदार्थहरू अलग गर्दा ध्रुवीय स्तम्भ चयन गर्नुहोस्। क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भ निर्धारण गरिसकेपछि, क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भको कार्य तापमान नमूनामा परीक्षण गरिने घटकहरूको वितरण गुणांकमा भिन्नता अनुसार निर्धारण गरिन्छ। साधारण प्रणालीहरूको लागि आइसोथर्मल विधि अपनाइन्छ, र वितरण गुणांकहरूमा ठूलो भिन्नता भएका जटिल प्रणालीहरूको विश्लेषणको लागि प्रोग्राम गरिएको तापक्रम विधि अपनाइन्छ।

सामान्यतया प्रयोग हुने वाहक ग्यासहरू हाइड्रोजन, नाइट्रोजन, हेलियम, इत्यादि हुन्। हाइड्रोजन र हेलियमको सानो आणविक तौल हुन्छ र प्रायः प्याक गरिएको स्तम्भ क्रोमेटोग्राफीको लागि वाहक ग्यासहरूको रूपमा प्रयोग गरिन्छ; नाइट्रोजन एक ठूलो आणविक वजन छ र अक्सर केशिका ग्यास क्रोमेटोग्राफी को लागी वाहक ग्यास को रूप मा प्रयोग गरिन्छ; हेलियम ग्यास क्रोमेटोग्राफी मास स्पेक्ट्रोमेट्रीको लागि वाहक ग्यासको रूपमा प्रयोग गरिन्छ।

3. प्रारम्भिक परिचालन अवस्थाहरू निर्धारण गर्नुहोस्

जब नमूना तयार हुन्छ र उपकरण कन्फिगरेसन निर्धारण गरिन्छ, परीक्षण विभाजन सुरु हुन सक्छ। यस समयमा, प्रारम्भिक विभाजन अवस्थाहरू निर्धारण गरिनु पर्छ, जसमा मुख्यतया इंजेक्शन भोल्युम, इंजेक्शन पोर्ट तापमान, डिटेक्टर तापमान, स्तम्भ तापमान र क्यारियर ग्याँस प्रवाह दर समावेश छ। इंजेक्शन भोल्युम नमूना एकाग्रता, स्तम्भ क्षमता र डिटेक्टर संवेदनशीलता मा आधारित छ। जब नमूना एकाग्रता 10mg/mL भन्दा बढि हुँदैन, प्याक गरिएको स्तम्भको इंजेक्शन भोल्युम सामान्यतया 1- 5uL हुन्छ, जबकि केशिका स्तम्भको लागि, विभाजन अनुपात 50:1 हो भने, इंजेक्शन भोल्युम सामान्यतया 2uL भन्दा बढी हुँदैन। इंजेक्शन पोर्टको तापमान मुख्यतया नमूनाको उबलने बिन्दु दायरा द्वारा निर्धारण गरिन्छ, र क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भको अपरेटिङ तापमान पनि विचार गर्नुपर्छ। सिद्धान्तमा, इन्जेक्शन पोर्टमा उच्च तापक्रम हुनु फाइदाजनक हुन्छ, सामान्यतया नमूनामा उच्चतम उम्लने बिन्दुको साथ कम्पोनेन्टको उम्लने बिन्दुको नजिक, तर सजिलै विघटित तापक्रम भन्दा कम।

4. विभाजन अवस्था को अनुकूलन

पृथक्करण अवस्थाहरूको अनुकूलनको उद्देश्य छोटो विश्लेषण समयमा आवश्यक विभाजन परिणामहरू प्राप्त गर्नु हो। जब स्तम्भको तापक्रम र क्यारियर ग्याँस प्रवाह दर परिवर्तन गरेर आधारभूत विभाजनको उद्देश्य हासिल गर्न सकिँदैन, लामो क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भ प्रतिस्थापन गर्नुपर्छ, वा फरक स्थिर चरणको साथ क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भ पनि, किनभने GC मा, क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भ विभाजनको सफलताको कुञ्जी हो।

5. गुणात्मक पहिचान

तथाकथित गुणात्मक पहिचान भनेको क्रोमेटोग्राफिक शिखरहरूको एट्रिब्युशन निर्धारण गर्न हो। साधारण नमूनाहरूको लागि, तिनीहरू सन्दर्भ सामाग्री द्वारा विशेषता गर्न सकिन्छ। अर्थात्, एउटै क्रोमेटोग्राफिक अवस्थाहरूमा, मानक नमूना र वास्तविक नमूनालाई अलग-अलग इन्जेक्ट गर्नुहोस्, र क्रोमेटोग्राममा कुन चोटीलाई अवधारण मान अनुसार विश्लेषण गरिने घटक हो भनेर निर्धारण गर्नुहोस्। यो ध्यान दिनुपर्छ कि विभिन्न यौगिकहरूको एउटै स्तम्भमा समान अवधारण मान हुन सक्छ, त्यसैले यो अज्ञात नमूनाहरूको गुणात्मक निर्धारणको लागि मात्र एक अवधारण डेटा प्रयोग गर्न पर्याप्त छैन। डबल-स्तम्भ वा बहु-स्तम्भ रिटेन्सन सूचकांक गुणात्मक विधि GC मा अधिक भरपर्दो छ, किनभने विभिन्न स्तम्भहरूमा एउटै अवधारण मूल्य भएको विभिन्न कम्पाउन्डहरूको सम्भावना धेरै सानो छ। ग्यास क्रोमेटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री प्रयोग गर्न सकिन्छ जब परिस्थितिले अनुमति दिन्छ।

6. मात्रात्मक विश्लेषण

कम्पोनेन्टको सामग्री परीक्षण गर्नको लागि कुन मात्रात्मक विधि प्रयोग गर्ने भनेर निर्धारण गर्न आवश्यक छ। सामान्य रूपमा प्रयोग हुने क्रोमेटोग्राफिक मात्रात्मक विधिहरू शिखर क्षेत्र (शिखर उचाइ) प्रतिशत विधि, सामान्यीकरण विधि, आन्तरिक मानक विधि, बाह्य मानक विधि र मानक थप विधि (सुपरपोजिसन विधि पनि भनिन्छ) बाहेक अरू केही होइनन्। शिखर क्षेत्र (शिखर उचाइ) प्रतिशत विधि सरल तर कम से कम सटीक छ। नमूनामा होमोलगहरू समावेश भएमा वा कुनै नराम्रो मात्राको लागि मात्र हो भने यो विधि वैकल्पिक हुन्छ। तुलनामा, आन्तरिक मानक विधिमा उच्चतम मात्रात्मक शुद्धता छ किनभने यसले मानक (आन्तरिक मानक भनिन्छ) को सापेक्ष प्रतिक्रिया मान प्रयोग गरेर परिमाण निर्धारण गर्दछ, जुन क्रमशः मानक नमूना र अज्ञात नमूनामा थपिएको छ, जसले गर्दा अपरेटिङ अवस्थाहरूमा उतार-चढावका कारण त्रुटिहरू (इन्जेक्शन भोल्युम सहित) अफसेट गर्न सकिन्छ। मानक थप विधिको लागि, परिक्षण गरिने पदार्थको मानक मात्रात्मक रूपमा अज्ञात नमूनामा थपिएको छ, र त्यसपछि एक मात्रात्मक गणना शिखर क्षेत्र (वा शिखर उचाइ) मा वृद्धिको आधारमा गरिन्छ। नमूना तयारी प्रक्रिया आन्तरिक मानक विधिसँग मिल्दोजुल्दो छ, तर गणना सिद्धान्त पूर्णतया बाह्य मानक विधिबाट व्युत्पन्न हुन्छ। मानक थप कानूनी मात्रा को शुद्धता आन्तरिक मानक विधि र बाह्य मानक विधि बीच हुनुपर्छ।

7. विधि प्रमाणिकरण

तथाकथित विधि प्रमाणीकरण भनेको विकसित विधिको व्यावहारिकता र विश्वसनीयता प्रमाणित गर्नु हो। व्यावहारिकताले सामान्यतया प्रयोग गरिएका सबै उपकरण कन्फिगरेसनहरू वस्तुको रूपमा किन्न सकिन्छ कि छैन, नमूना प्रशोधन विधि सरल र सञ्चालन गर्न सजिलो छ कि छैन, विश्लेषण समय उचित छ कि छैन, र विश्लेषण लागत साथीहरूलाई स्वीकार्य छ कि छैन भन्ने बुझाउँछ। विश्वसनीयतामा परिमाणीकरणको रैखिक दायरा, पत्ता लगाउने सीमा, विधि रिकभरी, दोहोरिने योग्यता, पुन: उत्पादन योग्यता र शुद्धता समावेश छ।